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發布時間:3/6/2022 4:20:00 PM

高效液相色譜法:以氣相色譜為基礎,在經典液相色譜實驗和技術基礎上建立的一種液相色譜法。

HPLC與經典LC區別:固定相差別,輸液設備和檢測手段。1.LC:僅作為一種分離手段;①柱內徑1~3cm,固定相粒徑>100μm且不均勻;②常壓輸送流動相;③柱效低(H↑,n↓);④分析周期長;⑤無法在線檢測;2.HPLC:分離和分析;①柱內徑2~6mm,固定相粒徑<10μm(球形,勻漿裝柱);②高壓輸送流動相;③柱效高(H↓,n↑);④分析時間大大縮短;⑤可以在線檢測;

HPLC與GC差別:相同:兼具分離和分析功能,均可以在線檢測;主要差別:分析對象的差別和流動相的差別;1.分析對象:GC:①能氣化、熱穩定性好、且沸點較低的樣品;②高沸點、揮發性差、熱穩定性差、離子型及高聚物的樣品不可檢測,占有機物的20%;HPLC:①溶解后能制成溶液的樣品;②不受樣品揮發性和熱穩定性的限制;③分子量大、難氣化、熱穩定性差及高分子;④和離子型樣品均可檢測;⑤用途廣泛,占有機物的80%;2.流動相差別:GC:①流動相為惰性氣體;②組分與流動相無親合作用力,只與固定相作用;HPLC:①流動相為液體;②流動相與組分間有親合作用力,為提高柱的選擇性、改善分離度增加了因素,對分離起很大作用;③流動相種類較多,選擇余地廣;④流動相極性和pH值的選擇也對分離起到重要作用;⑤選用不同比例的兩種或兩種以上液體作為流動相;⑥可以增大分離選擇性;3.操作條件差別:GC:加溫操作;HPLC:①室溫;②高壓;(粘度大,峰展寬?。?/span>

HPLC法中分離條件的選擇:1.固定相與裝柱方法的選擇:選粒徑小的、分布均勻的球形固定相(dp≤10μm);首選化學鍵合相,勻漿法裝柱;2.流動相及其流速的選擇:選粘度小、低流速的流動相—甲醇,1mL/min;3.柱溫的選擇:選室溫25℃左右;

---本文摘自《實驗與分析》

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